60 ÀÃÐÎÁÈÎ òåõíèêà 2'2019 агробиотехника е а Хроматографи за определяне на аминокиселини За определяне на аминокиселини в състава на фуражите се използватуреди за йонообменна хроматография. Свободнитеаминокиселини се извличат с разредена солна киселина. Извлечените паралелно с тях азотисти макромолекули се утаяват със сяро-салицилова киселина и отстраняват посредством филтриране. Филтрираният разтвор се коригира до pH 2,20. Аминокиселините се отделят посредством йонообменна хроматографска колона и съдържанието им се определя посредством нинхидринова реакция с фотометрично отчитане при 570nm. Колоната се запълва със сулфонирани полистиренови смоли, които могат да отделят аминокиселините една от друга и от други вещества, реагиращи положително на нинхидрин. Циркулацията на буферния разтвор и на нинхидриновия реагент се осигурява от помпи с устойчивост на потока от ±0,5% за целия период, включващ както стандартното времетраене на калибрирането, така и извършване на анализа на пробата. При някои уреди за анализ на аминокиселини може да се използва хидролизна процедура, при която хидролизатът е с концентрация на натрий 0,8mol/l и съдържа цялата остатъчна мравчена киселина от етапа на окисляването. Други уреди не осигуряват задоволително отделяне на някои определени аминокиселини, ако хидролизатът съдържа излишък отмравчена киселина или високи концентрации на натриеви йони. В този случай количеството на киселината се намалява чрез изпарение до приблизително 5ml след хидролизата и преди коригиране на киселинността. Изпарението се извършва във вакуумна среда при максимум 40°С. Хроматографията на аминокиселините варира леко според типа на уреда за анализ и според използваната смола. Използваната система трябва да е в състояние да отдели аминокиселините една от друга и от вещества, реагиращи положително на нинхидрин. В работния диапазон на хроматографската систематрябва да се наблюдава линейна зависимост спрямо промяната на количествата аминокиселини, които севъвеждатв колоната. За разграничаването на треонин от серин съотношението между най-ниската и най-високата стойност върху хроматограмата за по-слабо представената от двете застъпващи се аминокиселини не трябва да надвишава 2:10. За всички останали аминокиселини разграничаването трябва да бъде по-добро от 1:10 пробата, поставенав кюветатаили сканирана пред анализатора, се сравнява чрез модели на корелация с вече намиращите се в паметта на прибора еталонни спектри на проби. В резултат от съпоставянето на екрана излиза стойността на изследвания параметър в съответните единици на измерване. Такива системи и апарати обикновено се предлагат със софтуер за промяна или създаване на нови калибровки. Измерването е бързо – от няколко секунди до няколко минути. Weende анализ – сушилни, пещи и апарат на Келдал Схемата weende за химичен анализ на груби фуражи е деструктивна и се базира на разделянето на фуражната проба на суров протеин, суровивлакнини, суровимазнинии суровапепел, а другата част е неопределеният остатък и се класифицира като безазотни екстрактни вещества.Необходимаемелница заравномерно раздробяване, аналитични везни за измерване с точностдо 1mg, сухи съдове отнекородиращ метал или от стъкло, с капаци, осигуряващи херметично затваряне иработна повърхност, позволяващаразстиланенаизследванатапроба с плътност около 0,3g/cm2. Друга нужна апаратура е електрическа изотермична пещ с подходяща вентилация, която осигурява бързо регулиране на температурата. Съдът се претегля заедно с капака с точност до 1mg. В претегления съд се измерват с точност до 1mg около 5g от пробата и се разстилат равномерно. Съдът, без капака, се поставя в предварително загрятата до 103oC пещ. За да се предотврати нежелателното спадане на температурата, съдът се поставя в пещта възможно най-бързо. Пробата се оставя да съхне четири часа, считано от времето на възстановяване на температурата от 103oC. Капакът се поставя обратно върху съда, последният се изважда от пещта, оставя се да изстива 30-45min в ексикатор и се претегля с точност до 1mg. Изчислява се загубата на тегло и се определя съдържанието на вода. Методътна Келдал дава възможностда се определи общото количество суров протеин във фуража на базата на съдържанието на азот. Пробата се изварява със сярна киселина в присъствие на катализатор. Киселинният разтвор се алкализира с разтвор на натриев хидроксид. Амонякът се дестилира и събира в определено количество сярна киселина, излишъкътот която се титрува със стандартен разтвор на натриев хидроксид. Необходима е апаратура за изваряване, дестилация и титруване по Келдал.
RkJQdWJsaXNoZXIy MTEyMTYwMw==